摘要：目的 构建含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的睾丸特异性新基因T490超表达质粒pDT490-EGFP,检测其在Hela细胞中的表达情况.方法 采用RT-PCR的方法从成年Balb/c小鼠睾丸组织中扩增T490基冈,将该基凶连接克降到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,再将T490和EGFP融合基因酶切下来,克隆到pcDNA3.1(-)真核超表达载体上,以构建重组质粒pDT490EGFP.将该重组质粒通过阳性脂质体Lipofectamine 2000导入Hela细胞系中,在荧光显微镜F观察转染24h后融合基因的超表达情况,并用RT-PCR的方法进一步证实目的 基因mRNA的表达水平.结果 RT-PCR获取编码T490基因的全序列cDNA,大小为508bp;DNA测序和PCR方法证实T490和EGFP融合基因成功克隆到真核超表达载体L;在荧光显微镜下,转染24h后的Hela细胞具有很强的绿色荧光;RT.PCR显示转染后的Hela细胞T490基因mRNA的表达明显.结论 重组质粒pDT490-EGFP构建成功,并在细胞内明显表达,此质粒可应用于研究睾丸特异性新基因T490的功能,为T490的生物学研究奠定基础.

摘要：目的 探讨改良Devine术式治疗小儿隐匿阴茎的疗效.方法 采用改良Devine术式,切除阴茎皮下异常的纤维条索状组织,将阴茎根部白膜固定在阴茎皮下筋膜上.结果 术后6个月至5年随访,疗效满意,未见阴茎回缩.结论 改良Devine术式操作简单,外观满意,是实用的手术方法.

摘要：目的 了解老年男性前列腺疾病的发病情况探讨前列腺特异性抗原(PSA)在前列腺癌诊断中的价值.方法 对1234名老年男性进行前列腺指检(DRE)和PSA测定,然后对其中PSA＞4.0ng/mL者进行了随访复查,检查项目包括PSA和经亢肠前列腺超声,并建议行前列腺穿刺活检.结果 1234例调查者中,PSA＞4.0ng/ml者146例,其中126例得到随访,并接受了经亢肠超卢引导F"10点法"前列腺穿刺活检,其中101例前列腺增生患者中,PSA为(8.4±14.2)ng/ml,而25例前列腺癌患者中,PSA明显增高,为(29.3±17.5)ng/ml,两组相比筹异有统计学意义(P＜0.05);101例前列腺增生患者中,所测PV值为(32.61±16.19)ml,而25例前列腺癌患者所测PV值为(36.13±12.73)ml,两者相比差异无明显统计学意义(P＞0.05).比较不同PSA浓度与前列腺癌发牛率的关系,PSA＞10ng/ml时其前列腺癌的发生率显著高于4ng/ml＜PSA＜10nglml组.前列腺癌组PSA值显著高于前列腺增生组,两组前列腺体积相比差异无统计学意义.结论 PSA是诊断前列腺癌的重要瘤标,前列腺"10点法"穿刺活检是诊断前列腺癌的有效方法.对PSA＞4.0ng/ml的患者应密切随访复查,并建议行经直肠前列腺穿刺活检.对PSA高于10ng/ml时应高度警惕前列腺癌的发生.

摘要：目的 探讨电压依赖型T-型及L-型钙通道亚基在SD大鼠前列腺平滑肌细胞(SPSMCs)中的表达.方法 分离、培养和纯化大鼠前列腺平滑肌细胞,并利用免疫细胞化学的方法检测a.平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin,a-SMA)进行细胞鉴定;采用RT-PCR技术观察大鼠前列腺平滑肌细胞中钙离子通道不同亚基alC、alD、alG、alH mRNA的表达.结果 培养的细胞多呈长梭形,a-SMA免疫细胞化学染色为阳性,经传代纯化,纯度近100%.RT-PCR结果显示,可见L型钙通道alC、alD及T型钙通道alG的表达,未见alH的表达.结论 贴块法培养前列腺平滑肌细胞方法简便经济,可获得高纯度、状态良好的细胞,电压依赖型L-型钙通与T.型钙通道存在于原代培养的SPSMCs中,它们的变化可能改变前列腺半滑肌的收缩活性.